Revista Canal Abierto 41 | Artículo Científico

Microfiltración Bacteriana de tres Cementos Endodónticos

Resumen

El propósito de este estudio fue determinar la filtración coronaria con En- terococcus faecalis, en dientes unirradiculares obturados con la técnica de cono único de gutapercha, utilizando tres selladores endodónticos: Sealer 26, MTA Endo Sealer y MTA Fillapex.

Treinta y cuatro dientes humanos extraídos (incisivos centrales, caninos in- feriores y superiores) fueron instrumentados hasta una lima F4 del sistema ProTaper Universaly; los especímenes fueron esterilizados con óxido de etile- no. Posteriormente, todos los dientes fueron divididos al azar en 3 grupos de 10 dientes (n=10), quedando cuatro para los controles positivos y negativos. Todos los dientes de los grupos 1, 2 y 3 fueron obturados con un cono único Protaper F4, utilizando como sellador para el grupo uno Sealer 26, para el dos MTA Endo Sealer y en el tres MTA fillapex.

Para esta experiencia se utilizó la técnica de doble cámara propuesta por Torabinejead.

Se colocaron 2 ml de inóculo en las cámaras superiores y se incubaron a 37°C. El inóculo fue renovado cada 72 hs durante todo el ensayo.

Los modelos se observaron diariamente para evaluar la turbidez del caldo en la cámara inferior durante 40 días.

Las muestras de control positivo mostraron turbidez en el segundo día de incubación, y los especímenes de control negativo no mostraron turbidez en todo el periodo experimental.

Los resultados indicaron que los canales obturados donde se utilizó el Sea- ler 26 tuvieron una mejor performance, seguidos por el sellador MTA Endo Sealer y el MTA Fillapex, aunque las diferencias no fueron significativas, con- cluyendo que ningún material puede sellar completamente el canal radicular.

Palabras claves: Microfiltración bacteriana, Sellador endodóntico, Biocerámicos.

Summary

The purpose of this study was to determine the coronal leakage to Entero- cocus Faecalis, using three endodontics sealers: Sealer 26, MTA Endo Sea- ler and MTA Fillapex.

Thirty four human extracted teeth (upper central incisors, upper and lower canines), were instrumented up F4 file (ProTaper Universal System). After that all the specimens were sterilized with ethylene oxide.

All teeth were divided at random into three groups of ten each (n=10), and the remaining four teeth were used as positive and negative con- trols, respectively.

Each tooth of groups 1, 2 and 3 was obturated with ProTaper F4 unique cone, using the following sealers: Sealer 26 in group 1, MTA Endosealer in group 2 and MTA Fillapex in group 3.

For this experience, it was utilized the double chamber technique proposed by Torabinejad.

The samples were inoculated with 2 ml of inoculums into the upper cham- bers and incubated at 37ºC. The inoculums were renewed each 72 hours during the test.

The models were observed every day to evaluated the turbidity of the cul- ture medium in the lower chamber during the next 40 days.

The positive control of the samples showed turbidity at the second day of inoculation while the negative control showed no turbidity during all the experimental period.

The  results  showed  that  canals  obturated  with  Sealer  26  had  a  better performance when compared with MTA Endo Sealer and MTA Fillapex, although the differences were not significant.

It was observed that no material had performed better to effectively seal the root canal.

Keywords: Bacterial microfiltration, Endodontic sealer, Bioceramics.

Introdución

La filtración coronal del sistema de canales radiculares es considera- da una causa importante del fracaso en la terapia endodóntica (1). La falta  de  una  rehabilitación  correcta,  caries  y  microfracturas  pueden producir una recontaminación del canal radicular (2).

Con la intención de mantener la desinfección lograda en la terapéu- tica endodóntica, se intenta obturar tridimensionalmente el espacio conformado con distintos materiales, siendo la gutapercha acompa- ñado por selladores lo más comúnmente utilizado. Estos materiales de obturación presentan en su composición diferentes propiedades físicasy químicas, que pretenden limitar o evitar el desarrollo y la fil- tración bacteriana.

En este estudio fueron utilizados tres selladores: Sealer 26, MTA Endo Sealer y MTA Fillapex. El Sealers 26 es un sellador de base resinosa que contiene hidróxido de calcio, el MTA Endo Sealer es un material elaborado a base de trióxido mineral con un vehículo acuoso de alco- holes polivinílicos y el MTA Fillapex es un sellador a base de MTA en su composición (3).

El propósito de este estudio fue determinar la filtración coronaria con Enterococcus faecalis, en dientes unirradiculares obturados con la téc- nica de cono único de gutapercha, utilizando tres selladores endodón- ticos: Sealer 26, MTA Endo Sealer y MTA Fillapex.

Materiales y Métodos

Preparación de las muestras.

Treinta  y  cuatro  dientes  humanos  extraídos  (incisivos  centrales, caninos  inferiores  y  superiores)  fueron  utilizados  en  este  estudio, previa autorización del Comité de Ética del Hospital José Bernardo Iturraspe  de  la  ciudad de Santa  Fe, Argentina.  Los  dientes  fueron radiografiados en el plano mesiodistal y bucolingual para corrobo- rar  la  existencia  de  un  solo  canal  radicular  y  luego  almacenados en suero fisiológico para mantenerlos hidratados. Posteriormente, se  colocaron  en  hipoclorito  de  sodio  a  5.25  %  Endo-quim  (Tede- quim  SRL, Córdoba-Argentina)   por  30  minutos  para  su  desinfec- ción y seccionados a una longitud de 15 mm en promedio para su estandarización radicular.A continuación fueron evaluados con un microscopio óptico Newton serie 21 (modelo Meco 1B. Argentina) para descartar la posibilidad de fisuras o fracturas.

Los canales radiculares fueron instrumentados por el mismo ope- rador hasta una lima F4 del sistema ProTaper Universal (Dentsply Sirona. Ballaigues, Suiza). El motor utilizado fue xSmart (Dentsply Sirona.  Ballaigues,  Suiza).  La  longitud  de  trabajo  fue  establecida a  1  mm  del  foramen  apical,  y  los  mismos  fueron  permeabilizados

con una lima tipo K #10 (Dentsply Sirona, Ballaigues, Suiza). Apro- ximadamente 1ml de hipoclorito de sodio al 5.25% se utilizó como irrigación  entre  cada  lima. Como  irrigación  final,  se  continuó  con 1 ml del EDTA (Farmadental, lote 060418. Argentina) al 17%, acti- vándolo con el EndoActivator (Dentsply Sirona, Ballaigues, Suiza) por 1 minuto y posteriormente se irrigó con 5ml de agua destilada. Para  todo  el  procedimiento  de  irrigación  se  empleó  una  agu- ja  25G  x  5/8”  (Neojet  Zhejiang-China).  Los  canales  se  secaron con  puntas  de  papel  estériles  y  los  especímenes  fueron  esteri- lizados  con  óxido  de  etileno  para  eliminar  la  carga  bacteriana. Posteriormente,  todos  los  dientes  fueron  divididos  al  azar  en  3 grupos de 10 dientes(n=10), quedando cuatro para los controles positivos y negativos.

Grupo  1:  Obturado  con  cono  único  de  gutapercha  ProTaper    F4 (Dentsply, lote 2195601. Brasil) y sellador Sealer 26 (Dentsply, lote 118564H. Brasil).

Grupo  2:  Obturado  con  cono  único  de  gutapercha  ProTaper  F4 (Dentsply, lote 2195601. Brasil) y sellador MTA Endo Sealer (Den- sell, lote RK0519. Argentina).

Grupo  3:  Obturado  con  cono  único  de  gutapercha  ProTaper  F4 (Dentsply,  lote  2195601. Brasil)  y  sellador  MTA  Fillapex  (Angelus, lote 40948. Brasil).

Grupo Control  negativo:  2  dientes-obturados  con  un  cono  único de  gutapercha  ProTaper  F4  y  sellador  Sealer  26.  Las  superficies apicales y coronarias de ambos especímenes fueron cubiertas to- talmente con 3 capas de barniz de uñas.

Grupo Control positivo: 2 dientes- obturados con un cono de gutaper- cha ProTaper F4 ajustado dentro del conducto radicular sin sellador.

Todos los dientes fueron colocados en 4 placas de Petri, al 100% de humedad, y mantenidos en una incubadora a 37 C durante 7 días, para asegurar el endurecimiento de los selladores.

Para  esta  experiencia  se  utilizó  la  técnica  de  doble  cámara  pro- puesta por Torabinejead (3). El modelo fue desarrollado con fras- cos plásticos de 20 centímetros cúbicos. Los especímenes fueron ubicados en las tapas de los frascos, generando el sistema de do- ble  cámara  (figura  1).   Los  dientes  fueron  cementados  a  la  tapa del  frasco  con  polímero  acrílico  en  dispersión  acuosa  (Recuplast Argentina).

Los  modelos  fueron  rotulados  como  Sealer  26  1  a  10,  MTA  Endo Sealer 1 a 10 y MTA Fillapex 1 a 10, dos controles negativos y dos controles positivos.

Las  cámaras  superiores  e  inferiores  con  los  especímenes  se  este- rilizaron  por  óxido  de  etileno.  Una  vez  estériles,  los  dispositivos se montaron en cabina de seguridad (NuAire, USA), colocando en cada  cámara  inferior  10 ml  de  Infusión Cerebro Corazón  (BHI-Bri- tania) de modo que el extremo apical de las piezas dentales se en- contrara sumergido en el medio de cultivo. Los modelos de estudio se incubaron durante 7 días a 37°C para verificar su esterilidad.

Transcurrido este tiempo, se preparó un inóculo de la cepa de En- terococcus faecalis ATCC 29212. Para ello se tomaron colonias de un  cultivo  de  24 h  y  se  realizó  una  suspensión  de  las  mismas  en BHI  hasta  lograr  una  turbidez  de  0,5  en  la  escala  de  Mc  Farland (1,5 x 108 UFC/mL).

Se colocaron 2 mL de este inóculo en las cámaras superiores y se incubaron a 37°C. El inóculo fue renovado cada 72 h durante todo el ensayo para mantener la viabilidad del microorganismo.

Los modelos se observaron diariamente para evaluar turbidez del caldo en la cámara inferior durante 40 días.

Aquellos que resultaron turbios fueron subcultivados en placas de agar  sangre  preparadas  con Agar  Base Columbia  (Britania)  con  el agregado de 5% de sangre ovina (Britasheep Britania). A las 24h de incubación, se observó la presencia de hemólisis beta en agar san- gre  y  se  confirmó  la  identificación  realizando  las  pruebas  de  Bilis esculina y l pirrolidonilarilamidasa.

Resultados

Las muestras de control positivo mostraron turbidez en el se- gundo día de incubación, y los especímenes de control negativo no mostraron turbidez en todo el periodo experimental.

Al día 12 resultaron positivos el MTA Endo Sealer  n6 y cinco fras- cos de la serie MTA Fillapex (n2, n4, n6, n8 y n9). Al día 15 fueron positivas  dos  muestras  del  MTA  Endo  Sealer  (n4  y  n7),  una  del MTA  Fillapex  n7  y  dos  del  grupo  Sealer  26  (n2  y  n10).  El  MTA Endo  Sealer  n9  y  Sealer  26  n4  se  positivizaron  a  los  18  días  de incubación.

Al  día  22  se  observó  turbidez  en  Sealer  26  n1,  el  día  24  posi- tivisaron  el  MTA  Endo  Sealer    n10  y  n3.    El  día  27  el  Sealer  26 n9  y  el  día  32 en  MTA  Fillapex  n10. A  los  34  días  de  incubación resultaron positivos MTA Fillapex n3, cuatro modelos de la serie Sealer  26 (n3,  n5,  n6  y  n8)  y  cuatro  de  la  serie  MTA  EndoSealer (n1, n2, n5 y n8).

El resto de las probetas, Sealer 26 (n7) y MTA Fillapex (n1 y n5) se mantuvieron negativas en los 40 días.

Análisis de tiempo al evento (aparición de filtración) – técnica de Kaplan-Meier

Mediante prueba de log-rank no se encontró diferencia significa- tiva entre grupos.

Discusión

En este estudio, se utilizó la técnica de cono único de gutapercha en frío, que ha sido revalorizada en los últimos tiempos (4), ocupando los selladores una mayor incidencia en la obturación tridimensional de los canales radiculares. La filtración microbiana es, entre otros mé- todos, la que más se acerca a las condiciones clínicas para evaluar la microfiltración de las obturaciones endodónticas (5). En este estudio, se usó la técnica de doble cámara, método que fue introducido por Torabinejad y colaboradores (6). Se empleó el Enterococcus faecalis por ser un patógeno oportuno, anaerobio, facultativo, gram positi- vo, relacionado principalmente en los casos de fracasos endodón- ticos. Este microorganismo se desarrolla en presencia o ausencia de oxígeno, y sobreviven a un pH alcalino de 9,6 (7).

La capacidad selladora de los cementos utilizados en endodoncia de- pende de su fluidez, tamaño de partícula, adhesividad a las paredes dentinarias y actividad antibacteriana, entre otras variables. En este estudio, los tres materiales presentan distintas propiedades físicas y químicas que pueden marcar diferencias en la resistencia a la filtra- ción bacteriana.

Los resultados indican que los canales obturados donde se utilizó el Sealer 26 tuvieron una mejor performance, seguidos por el sellador MTA Endo Sealer y el MTA Fillapex, aunque las diferencias no fueron significativas.

El Sealer 26 presentó el mejor promedio en esta experiencia. Los ce- mentos  obturadores  a  base  de  resina  epóxica  e  hidróxido  de  calcio tienen  efecto  antimicrobiano,  acción  confirmada  por  Provenzano  y col. en 2011, Siqueira y col. en 2000, Tanomaru-Filho y col. en 2007. El primero señala que Sealer 26 muestra dicha actividad frente al Entero- coccus faecalis; esto es atribuido a la presencia de hexametilenotetra- mina en su composición, la cual en contenido acuoso se descompone en formaldehído y amoniaco. Este efecto también puede atribuirse a la presencia de hidróxido de calcio, ya que éste libera iones hidroxilo y au- menta el pH. Da Silva y col. describen que Sealer 26 llega a alcanzar un pH de hasta 9.5.  Estas propiedades antibacterianas se complementan con la fluidez y adhesión a las paredes dentinarias, el menor espesor de película y la penetración en los túbulos dentinarios (8-10). Fidel y col. encontraron que Sealer 26 presentó adecuada fuerza de adherencia a la dentina cuando se utiliza EDTA, siendo esta de 2.58 MPa, no viéndose mermada por la presencia del hidróxido de calcio (11).

El MTA Endo Sealer presenta un pH 12 sostenido en el tiempo, el cual posiblemente retrasaría o limitaría la filtración bacteriana, situación que no se vislumbró en esta experiencia. Posiblemente, el efecto buffer de la dentina y del cono de gutapercha sobre el pH del sellador, el tamaño de sus partículas con un promedio de 15 micras (que impiden su penetración en conductillos dentinarios), y el entrampamiento de burbujas en la masa del sellador, pueden explicar los resultados de filtración obtenidos.

Estudios del MTA Fillapex revelan un alto grado de solubilidad(12,13) y una pérdida de su actividad antibacteriana a los 7 días después de su mez- cla(14), lo cual podría explicar los resultados de la presente experiencia.

No fue gravitante en esta experiencia el pH que presentan estos mate- riales en inhibir el desarrollo bacteriano, ni sus características antisépti- cas. En los resultados parecería que las propiedades físicas, (fluidez, gra- no de partícula, tiempo de endurecimiento, capacidad selladora) tienen más preponderancia en el sellado inicial de los canales radiculares.

No  obstante,  estos  materiales  resinosos  presentan  diferentes  com- portamientos  negativos  en  el  tiempo,  como  contracciones,  micro- fracturas  y  resquebrajamiento  por  envejecimiento.  Así  mismo,  el MTA  demuestra  expansión  con  interacción  química  con  la  dentina, mejorando su capacidad selladora en el tiempo(15).Estas situaciones plantean interrogantes que derivarán en futuras investigaciones.

Es necesario reconocer, desde el punto de vista de los resultados ob- tenidos, las limitaciones del presente trabajo, teniendo en cuenta las variables existentes entre las muestras (morfología de los canales y forámenes apicales, las posibles variaciones en la estandarización de los conos(16)) que posiblemente sean los responsables en las discre- pancias  dentro  de  un  mismo  grupo. Esto  explicaría  la  necesidad  de aumentar el número de muestras en futuras experiencias, para una mejor interpretación de los resultados de cada sellador.

Las condiciones experimentales de este estudio no permiten extrapo- lar los resultados a lo que ocurre en un ambiente clínico. Sin embar- go, favorece la comparación de materiales bajo estrictas condiciones controladas.

Conclusión

Los resultados de este estudio son consistentes con otras investi- gaciones  que  concluyeron  que  ningún  material  puede  sellar  com- pletamente  el  canal  radicular  (17,18),  siendo  el  Sealer  26  el  que mostró una mejor performance, seguido por el MTA Endo Sealer y MTA Fillapex, sin diferencias estadísticas significativas.

Agradecimientos

Los autores expresan su profundo agradecimiento al Dr. Fernan- do Goldberg, al Dr. Ricardo Macchi y a la Sección de Microbiolo- gía del Hospital José Bernardo Iturraspe.

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